RESUMEN
Esta practica de laboratorio se realizo para poder identificar cualitativamente los carbohidratos presentes en distintas sustancias las cuales tomamos como muestras. La extracción de los carbohidratos se hace con el fin de identificar cada uno de ellos según su clasificación por sus cantidades de carbono, como lo pueden ser las triosas, tetraosas, pentosas y hexosas a través de reacciones químicas en las cuales utilizamos distintos reactivos:
- Reacción de Fehling: Identifica los azucares reductores. Si la muestra queda azul, será negativa.
- Reacción de Lugol: Identifica polisacáridos. Si la muestra se torna a un color azul violeta, será negativa.
- Reacción de Molish: Provoca deshidratación de azúcar. Formación de un anillo purpura indicará que la reacción es positiva.
- Reacción Bial: Identifica carbohidratos aldopentosas. La coloración verde indica la presencia de pentosas.
- Reacción de Seliwanoff: Se usa para distinguir aldosas de cetosas. La coloración salmón 8 rojo cereza evidencia la presencia de cetohexosas.
Con cada uno de los anteriores reactivos se realizaron diferentes procedimientos aplicados a cada una de las muestras que cada estudiante llevo al laboratorio: bebida light, bebida energética, 7up, almidón, bebida hidratante, sacarosa, almidón, un trozo de papa y un trozo de zanahoria.
ABSTRACT
This practice of laboratory was conducted to identify qualitatively the carbohydrates present in different substances which we take as samples. The extraction of carbohydrates is made in order to identify each of them according to their classification in their amounts of carbon, as the triosas, tetraosas, pentoses and hexoses can be through chemical reactions in which we use different reagents:
Reaction of Fehling: identifies sugars reducers. If the sign is blue, it will be negative.
Lugol reaction: identifies polysaccharides. If the sample turns a violet-blue color, it will be negative.
Molish reaction: causes dehydration of sugar. Formation of a ring purple will indicate that the reaction is positive.
Bial reaction: It identifies carbohydrates aldopentosas. The Green coloration indicates the presence of pentoses.
Seliwanoff reaction: is used to distinguish aldoses to ketoses. 8 red cherry salmon coloration reveals the presence of cetohexosas.
With each of the above reagents were different procedures applied to each of the samples that each student took the lab: drink light, energy drink, 7up, cornstarch, drink hydrating, sucrose, starch, a piece of potato and a piece of carrot.
PALABRAS CLAVES
- CARBOHIDRATOS
- REACCION DE FEHLING
- REACCION DE LUGOL
- REACCION DE MOLISH
- REACCION DE BIAL
- REACCION DE SELIWANOFF
- TRIOSAS
- TETRAOSAS
- PENTOSAS
- HEXOSAS
- SACAROSA
- ALMIDON
- CETOSAS
- ALDOSAS
INTRODUCCIÓN
"Los carbohidratos (también llamados “hidratos de carbono”) son uno de los tres tipos de macro-nutrientes presentes en nuestra alimentación (los otros dos son las grasas y las proteínas). Existen en multitud de formas y se encuentran principalmente en los alimentos tipo almidón, como el pan, la pasta alimenticia y el arroz, así como en algunas bebidas, como los zumos de frutas y las bebidas endulzadas con azúcares. Los carbohidratos constituyen la fuente energética más importante del organismo y resultan imprescindibles para una alimentación variada y equilibrada."[2]
[2]http://www.eufic.org/article/es/expid/basics-carbohidratos/
METODOLOGÍA
En esta practica de laboratorio tomamos unas muestras de gaseosa, bebida light, bebida hidratante, bebida energizante, la sacarosa y el almidón (diluidos en agua anticipadamente) y el zumo de limón que necesitamos evaluar según los parámetros que les fueron aplicadas por medio de las distintas reacciones que se realizaron, en cada proceso tomamos 3 ml de muestra por cada una de las sustancias para cada uno de las reacciones que describiré posteriormente, primero realizamos la reacción de Fehling, añadiendo 1 ml del reactivo "A" y 1 ml del reactivo "B" a las muestras (esto con cada una de ellas), todo esto realizado en tubos de ensayo y posteriormente llevamos al baño maría por unos minutos. Seguido a esto realizamos la reacción con Lugol aplicando unas cuantas gotas del mismo a un trozo de papa y un trozo de zanahoria (previamente cortados). Procedimos a realizar la reacción con el reactivo de Molish a cada una de las muestras trabajadas tomadas nuevamente, añadiendo 3 gotas de este reactivo junto con 2 ml de ácido sulfúrico a dichas muestras. Seguidamente realizamos la reacción con el reactivo de Bial adicionando 4 ml del mismo a las muestras nuevamente tomadas de sus respectivas sustancias y dispusimos los tubos de ensayo en un baño maría por 15 minutos, y para culminar realizamos la reacción correspondiente al reactivo de Seliwanoff disponiendo 5 ml de este reactivo en las muestras nuevamente tomadas de cada una de las sustancias anteriormente nombradas y llevamos a baño maría por 5 minutos.
RESULTADOS
A lo largo de la realización de esta practica de laboratorio realizamos distintos procedimientos con cada una de las sustancias o muestras tomadas de dichas sustancias, de las cuales se logro observar unos resultados los cuales son los siguientes:
Lugol
MUESTRA
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PRESENCIA DE ALMIDÓN
|
PAPA + LUGOL
|
+
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ZANAHORIA + LUGOL
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-
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Reacción de Molish
Muestra
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Presencia de anillo
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Presencia de azucares
|
Gaseosa
|
+
|
+
|
Bebida light
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leve
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Bajo
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Zumo de limón
|
+
|
+
|
Sacarosa
|
+
|
+
|
Fructosa
|
+
|
+
|
Glucosa
|
+
|
+
|
Almidón
|
+
|
+
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Reacción de Seliwanoff
Muestra
|
Color observado
|
Presencia de cetosas
|
Gaseosa
|
-
| |
Bebida hidratante
|
Ladrillo intenso
|
+
|
Zumo de limón
|
-
| |
Sacarosa
|
Ladrillo intenso
|
+
|
Fructosa
|
Ladrillo intenso
|
+
|
Glucosa
|
amarillo
|
-
|
Almidón
|
-
|
Reaccion de Fehling
MUESTRA
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COLOR OBSERVADO
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PRESENCIA DE AZUCARES
|
Gaseosa
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Verde claro con capa amarilla
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+
|
Bebida light
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Amarillo quemado
|
+
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Zumo de limón
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Verdoso forma precipitado
|
+
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Sacarosa
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Azul poco amarillo
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-
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Fructuosa
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Rojo ladrillo
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+
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Glucosa
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Color amarillo
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+
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Almidón
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Azul oscura forma precipitado
|
-
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ANALISIS
En la reaccion con lugol, la papa se torna de color azul, allí Identificación de polisacáridos en este caso, el almidón(la amilosa forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón.
La Zanahoria no presento cambio de color por lo tanto no hay presencia de almidón. Pero al pasar un tiempo la muestra tomo un color oscuro esto se podría decir que ocurrió por algún agente externo del ambiente que se podría encontrar por ejemplo en el aire.
El color que dan los polisacáridos con el lugol (solución de I2 y de IK) se debe a que el I2 ocupa espacios vacíos en las hélices de la cadena de unidades de glucosa, formando un compuesto de inclusión que altera las propiedades físicas del polisacárido, especialmente la absorción lumínica. Esta unión del I2 a la cadena es reversible, y por calentamiento desaparece el color, que al enfriarse reaparece. El lugol da con el almidón color azul y con el glucógeno color rojo caoba.
El cambio de coloración a azul oscuro en la prueba de lugol, muestra la formación del yoduro de almidón.
En la reaccion de Molish, la sacarosa, la gaseosa, la glucosa, el zumo de limon y el almidon presentaron una formacion de anillo positiva, este anillo las identifica como carbohidratos.
La Bebida light no presento formacion de anillo por lo que inferimos que no hay presencia de carbohidratos
Este ensayo se usa para el reconocimiento general de carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del fulfural o 5-hidroximetil fulfural.
Si la prueba dio positivo, se identifico a los carbohidratos en las muestras, evidenciándose claramente la formación de un anillo en la superficie, esto se debió a que, al reaccionar el alfa naftol con los carbohidratos, este los tiñe, separando los carbohidratos del acido sulfúrico añadido después, por medio del anillo violeta en la superficie.
En la prueba de molish la sacarosa, fructosa y glucosa, son carbohidratos por lo que dieron positivo a la Reacción de Molish, evidenciándose un anillo violeta entre el ácido sulfúrico y la muestra donde la coloración fue mayor para la sacarosa, disminuye en la fructosa y en la glucosa fue mínima.
En el reactivo de Seliwanoff se distingue entre aldosas y cetosas. Los azúcares son distinguidos a través de su función como cetona o aldehído. Si el azúcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas.
La prueba de Seliwanoff nos permite identificar si un azúcar está formado estructuralmente por un aldehído o cetona.
En las muestras de Fructosa y Sacarosa y bebida hidratante una vez terminado el proceso de la reacción de Seliwanoff, nos emite una coloración roja, la cual nos indica que hay presencia de cetosa en la muestra de azúcar. Puesto que la sacarosa no es una cetosa pero está formado por glucosa y fructosa. La Fructosa al separarse de la glucosa y junto con el (HCl) que es un componente del reactivo de Seliwanoff obtenemos un resultado positivo.
Nos da positivo este reactivo en base a una cetosa en un azúcar desconocido cuando observamos una coloración roja en el precipitado
En la prueba con el reactivo fehling, la sacarosa, se torna de un color naranja oscuro, lo que evidencia la presencia del azúcar reductor,la bebida light toma un color amarillo quemado que a pesar de ser “light” contiene o presenta azucares simples, la gaseosa y el zumo de limón toma un color verde con la formación de una capa amarilla, presenta azucares. En la fructosa y la glucosa se forma un precipitado de color rojo ladrillo, la identificación de este color, nos indica presencia de un azúcar reductor.
Almidón se forma un precipitado de color rojo ladrillo, la prueba dio negativa para presencia de azucares.
El catión cúprico (Cu++) del reactivo de Fehling reacciona con los glúcidos reductores pasando a óxido cuproso, que es un precipitado de color rojo ladrillo. Esta es una reacción que resulta positiva sólo si el glúcido es reductor. Los glúcidos reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu++ en ese medio tiende a precipitar espontáneamente como óxido cúprico (que en esa forma no reacciona), de manera que es necesaria la presencia de tartrato doble de sodio y potasio en el reactivo para "secuestrar" al catión Cu++, a fin de evitar la formación del óxido cúprico, y permitir que reaccione con los glúcidos reductor
La prueba mas clara que nos indica si la reacción con el reactivo felihgh dio positiva o no es un precipitado rojo ladrillo, esto se debe a que la prueba reduce sales, de sales cúpricos a oxido cuproso (compuesto del color característico del precipitado) por medio del calor reduciendo el hidróxido cuproso, evidenciándose con el precipitado característico.
CONCLUSIONES
- Los carbohidratos cumplen funciones de reserva y funciones de obtención de energía para nuestro organismo
- En los carbohidratos se identificaron grupos funcionales como las cetonas y aldehídos, por ello estos tienen un comportamiento parecido, como la capacidad de oxidarse, con agentes oxidantes como el reactivo fehling, con esta prueba se pudo identificar monosacáridos de disacárido.
- Por medio de la prueba de Seliwanoff, se observa la diferencia entre los monosacáridos y disacáridos, por su poder reductor, a su vez se subdividen en aldosas y cetosas, en pentosas y hexosas, se evidencia la velocidad de deshidratación de las cetosas y aldosas.
BIBLIOGRAFIA
- Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology, Keith Wilson, University of HertfordshireJohn Walker, University of Hertfordshir, April 2010.
